紫外分光光度計基本原理:
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團的信息,可以用標準光譜圖再結合其它手段進行定性分析。
朗伯-比爾定律:當一束平行單色光通過含有吸光物質的稀溶液時,溶液的吸光度與吸光物質濃度、液層厚度乘積成正比,即A= kcl
式中比例常數k與吸光物質的本性,入射光波長及溫度等因素有關。c為吸光物質濃度,l為透光液層厚度。
紫外分光光度計應用:
分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。我們實驗室主要是用來測物質的光度以求得物質的濃度或者酶活。